잔류 dna 검출 방법

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알아보자 :: 잔류 dna 검출 방법

잔류 dna 검출 방법에는 현재 DNA 프로브 혼성화법, 형광 염색법, 역치법, 정량 PCR법의 4가지 방법이 있으며 형광 염색법을 예로 들면 다음과 같은 구체적인 조작이 있다.

1, 생물 안전 작업대의 자외선 램프를 켜고 30분 이상 조사 후 자외선 램프를 끄고 환풍기를 켭니다.

2. 생물안전 작업대에 불이 켜진 후 작업대와 일회용 멸균 피펫을 소독하기 위해 알코올 스프레이를 사용하다.

소독된 멸균 헤드 박스, 세포 배양 플레이트 및 기타 물품을 생물 안전 캐비닛에 넣습니다.

3. 시험할 검체를 꺼내어 생물안전 캐비닛으로 옮기고 멸균 스포이드를 사용하여 상층액을 꺼내 시험관에 옮깁니다.

4. 합류도가 30-40 인 T25 Vero 세포 3개를 준비하고 배양 상층액, 무항생제 배지 및 마이코플라스마 양성 세포를 병에 추가하다.

5. 3개의 병을 알코올로 소독하고 인큐베이터에 넣고 3-5일 동안 배양하다.

배양된 Vero 세포를 배양 플레이트에 각각 접종한 다음 배양액에 적당량의 배양액을 첨가하고 뚜껑을 덮고 흔들어 섞어서 세포가 고르게 분산되도록 하다.

6. 배양 플레이트를 인큐베이터에 넣고 3-5일 동안 배양하다.

배지를 꺼내어 진공펌프로 배지를 모두 흡수한 후 배양판에 멸균 PBS 용액을 균일하게 넣고 흔들어 헹군 후 흡인하여 3회 반복하다.

7. 마지막으로 신선한 고정용액 5ml를 넣고 15분간 방치한 후 흡인하여 자연건조하다.

8. 그런 다음 염색 용액을 웰에 추가하고 암실에서 30분 동안 염색한 후 염색 용액을 흡수하다.

배양 플레이트에 순수한 물을 넣고 흔들어 씻은 후 흡수하고 3회 반복한 후 자연 건조하다.

9. 자연 건조된 배양 플레이트를 현미경 아래에 놓고 형광 여기 전원 스위치를 켜고 형광 이미징 소프트웨어를 실행하여 배양 플레이트를 관찰하다.

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